mRNA制剂的挑战

▉ 前言

都只批准的mRNA乙型肝炎中会，遏制细胞核内传送和内吞棒状尾随已被证明是尝试的发送思路。然而，仍有一些关键解决办法，比如只能进一步遏制mRNA的交叉工作效率、增加细胞核基因表达性和高血压的依从性等。

▉ 异位工作效率和转染

充分探究mRNA基棒状胶棒状的细胞核内运输工具和影响因素所，将有助于开发内部设计更是必需和更是安全和的发送思路。然而，硫:羧酸基(N:P)通量、粒径和凹凸不平电荷及其与细胞核质传送工作效率的相互效用等还未研究成果透彻。对siRNA传送的研究成果表明，只有勉强2%的LNPs-siRNA从内吞棒状尾随到细胞核质。这表明，通过内吞棒状尾随种系统设计提高交叉工作效率仍有较大的紧致。

LNP hEPO mRNA内吞棒状尾随（Nat Commun. 2019;10(1):4333.）

此外，尚不清楚从内吞棒状尾随的是裸mRNA还是LNPmRNA。据思路，在内吞棒状和溶酶棒状的碱性腔内(pH5-6)利于金属离子糖浆类与隙带电的mRNA复合物，而不是释放单纯的mRNA。

都只有报导称，内吞的LNP-mRNA被原先制品成 细胞核外囊馒头 (EV) ，并从酶细胞核分泌。这种 “胞吐效用”现象 为原材料基棒状载棒状传送mRNA指明了另一个方向：应该该可以通过 EV在细胞核外通信 中会的生物学功能性来作出贡献细胞核外转染？。▉ 细胞核基因表达

更是软性的APC基因表达将通过两种方式提高转染工作效率，同时降低脱靶副效用。一是可软性地将mRNA传送给锥状状细胞核，二是通过酶底物介导的内吞效用作出贡献碳水化合物。在在的是，mRNA“基因表达”是为了仅有数量的mRNA基棒状胶棒状基因表达能够数量的锥状状细胞核，而不是将大量基棒状胶棒状基因表达相同的锥状状细胞核。

mRNA乙型肝炎内部设计的一些变量（Current Opinion in Immunology 2020, 65:14–20）

为了遏制APC的特定细胞核碳水化合物，可选择一个相应该的传送种系统设计是很重要的，如上所述。对于每种给小儿种系统设计，优所谓的参数不太有可能有所不同，之外糖浆类组成、胶棒状一般来说、凹凸不平（普贤）电荷、树脂所谓的程度，以及基于靶有组织右边的靶底物可选择。

特定底物的凹凸不平修饰将通过酶介导的机制 ，随之而来更是软性和快速的碳水化合物。例如，甘露糖浆基所谓和PEG-糖浆类已被最常研究成果用做多肽小儿物传送，并不太可能用做基因表达APC，因为锥状状细胞核和巨噬细胞核都携隙糖浆酶。▉ PEG所谓和不良反应该

树脂塑料不太可能系统设计会抑止树脂抑止棒状的导致，在随后的给小儿中会随之而来减速尿液清除(accelerated blood clearance，ABC)现象，及导致不良反应该。因此，报导的用做mRNA传送的LNP应该用做PEG2000-糖浆类并不多超过1.5mol%。

树脂所谓乙型肝炎不太有可能激起过去有高水平抑止树脂抑止棒状的人导致挽救灵魂的不良反应该。据报导，应该用做mRNA乙型肝炎后会有比较严重的不良反应该。美国病因管控和预防中会心地带(CDC)敦促对树脂（和多山梨醇酯）腹泻的个棒状不要接种mRNA COVID-19乙型肝炎，其他高血压应该在施用后顺利进行15-30分钟观察。因此， 没有抑止原性的树脂替代品 ，不太可能是研究成果的下一步，如HPMA。另一个未曾却说的解决办法是，PEG难题应该该可以通过 去PEG所谓思路 来改善，比如PEG在宿主细胞核内被降解去除。

在发送和平台不足之处，细胞核分泌的催化作用基棒状微囊馒头（Nano-EV）(30-150nm，也称作外泌棒状)已成为一种新传送载棒状，具显著战术上，之外生物相容性、非免疫原性、有组织出发点等。棒状外用DC细胞核制品mRNA（电穿孔），以实现对细胞核机理的精确管控。寻常的是，这种初始化过程可以导致mRNA微囊馒头，不太可能用做saRNA的发送，然而，对放大原材料规模相关联了关键时刻。

▉ 高血压依从性

只能顺利进行研究成果来解决解决办法与ID、SC和IM给小儿相关的施用部位反应该（水肿和红斑），这不太可能是由可游离成分激起的。

此外，根据mRNA的稳定性，内部设计中会的 持续释放技术 ，将剂量从两次剂量降低到一般来讲施用是非常令人满意的。 非鼻外给小儿和肺mRNA乙型肝炎 在改善高血压依从性不足之处，与非肠外给小儿相比之下，具明显的战术上，不太可能为对抑止肠胃染病病因包括一个有吸引力的可选择。通过必要的内部设计，通过解决解决办法黏膜屏障，以及细胞核屏障，在呼吸系统设计中会感受到强大的免疫

有鉴于探究并事与愿违预测发送系统设计的局部和系统设计运和能吸收动力学，这些动力学可以进一步与下游的小儿学和免疫反应该相结合。这种所谓学合成系统设计小儿学学方法确立了内部设计、高血压条件和治疗结果之外的联络，适当了安全和性和仅有限度地提高。

▉ 说明了

mRNA乙型肝炎虽然显出其类似于传统乙型肝炎的战术上，但是也存在一些关键时刻。比如如何提高内吞棒状尾随，更是好基因表达APC细胞核，甚至PEG所谓激起的致命不良反应该等，都是进一步发展所只能解决的解决办法。

参考文献：1.Maugeri M, Nawaz M, Papadimitriou A, Angerfors A, Camponeschi A, Na M, et al. Linkage between endosomal escape of LNP-mRNA and loading into EVs for transport to other cells. Nat Commun. 2019;10(1):4333.2.Banerji A, Wickner PG, Saff R, Stone CA Jr, Robinson LB, Long AA, et al. mRNA vaccines to prevent COVID-19 disease and reported allergic reactions: current evidence and suggested approach. J Allergy Clin Immunol Pract. 2020;S2213-2198(20): 31411–2.3.Zimei Wu Company Tonglei Li，Nanoparticle-Mediated Cytoplasmic Delivery of Messenger RNA4.Vaccines: Challenges and Future Perspectives，Pharm Res 5.Hassett KJ, Benenato KE, Jacquinet E, Lee A, Woods A, Yuzhakov O, et al. Optimization of lipid nanoparticles for intramuscular administration of mRNA vaccines. Mol Ther Nucleic Acids. 2019;15: 1–11.

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